激活态雪旺细胞联合脐血间充质干细胞移植修复脊髓损伤的研究

作者：周先虎; 冯世庆; 刘燊; 郝岩; 魏志坚; 林伟; 樊保佑; 任一鸣; 史桂东; 陈家童

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(10): 1734-1737.

• 脐血间充质干细胞
• 激活态雪旺细胞
• 脊髓损伤
• 神经修复
• 分化
• 联合移植

目的观察激活态雪旺细胞(ASCs)与人脐血间充质干细胞(HUCBMSCs)局部联合移植后脊髓损伤局部神经标志物的变化,探讨ASCs与HUCBMSCs联合移植在促进大鼠脊髓损伤后轴突再生和功能恢复方面所起的作用。方法采用前期实验方法获得ASCs及HUCBMSCs,并制作成年雌性Wistar大鼠胸10脊髓损伤模型。将80只大鼠随机分成4组:空白对照组[注射杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)];ASCs移植组;HUCBMSCs移植组;ASCs与HUCBMSCs联合移植组。分别将DMEM、ASCs、HUCBMSCs以及ASCs+HUCBMSCs移植入对应组的脊髓损伤部位。术后采用Basso,Beattie和Bresnahan(BBB)评分对大鼠的后肢功能恢复情况进行评价。于脊髓损伤后1、2、3、4周取脊髓损伤中心组织进行Western blot半定量检测及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测。12周后,从每组随机选取8只大鼠进行10%生物素葡聚糖胺(BDA)顺行示踪标记。标记2周后处死大鼠,将损伤段脊髓取出作5μm快速冰冻切片后,进行BDA显影、苏木素-伊红(HE)染色,神经丝蛋白-200(NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组织化学染色。综合以上数据并进行统计学分析。结果 Western blot及FQ-PCR结果显示NF-200及MBP表达量在各组均有升高,但以联合移植组最高(损伤后4周NF-200:4.581±0.588,MBP:3.922±0.259);损伤后8周,共移植组大鼠的BBB评分[(16.800 0±0.223 0)分]显著高于其余3组(P=0.000)。BDA顺行示踪标记显示共移植组较ASCs移植组和HUCBMSCs移植组有较多的再生神经纤维通过损伤区,而空白对照组几乎未见再生神经纤维穿越。HE染色显示细胞共移植组损伤空洞明显小于其余3组(P=0.000)。结论 ASCs联合HUCBMSCs移植治疗脊髓损伤可促进更多的HUCBMSCs向神经元方向分化,促进轴突再生,改善脊髓损伤后功能的恢复。

• 单位
  天津医科大学总医院