摘要
目的:探讨姜黄素对HIV-1辅助受体CCR5启动子活性的影响。方法:构建pFireRluc-CCR5重组载体,瞬时转染293T细胞;采用CCK-8法检测姜黄素对293T细胞活性的影响;利用双荧光素酶报告基因技术检测姜黄素对CCR5启动子活性的影响。结果:PCR方法分别扩增出CCR5启动子(987 bp)和Rluc(1 997 bp)表达单元,双荧光素酶报告基因表达载体pFireRluc-CCR5经酶切和测序鉴定,插入正确;根据CCK-8实验结果确定姜黄素给药浓度分别为10、20、40、60、80μmol/L;加药后,CCR5启动子活性显著下降(P<0.05),推测姜黄素能够显著降低CCR5启动子活性。结论:成功构建了pFireRluc-CCR5双荧光素酶报告基因表达载体,并证实其活性,姜黄素对CCR5启动子活性有显著抑制作用,具有潜在的抗HIV-1作用。
- 单位