耳缘静脉移植自体骨髓间充质干细胞治疗家兔氟骨症效果观察

作者：李晨; 蒋菲菲; 雷平贵; 邹迅; 陈义家; 潘雪莉

来源：环境与健康杂志, 2018, 35(02): 114-189.

DOI：10.16241/j.cnki.1001-5914.2018.02.005

• 氟骨症
• 家兔
• 骨髓间充质干细胞
• 移植

目的观察耳缘静脉移植自体骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对家兔氟骨症治疗的有效性和可行性。方法取家兔54只,雌雄各半,随机分为空白对照组(12只)和氟骨症模型组(42只),分别饮用含氟化钠0、300 mg/L的自来水。90 d后将42只模型组家兔随机分为示踪组(单次/多次耳缘静脉注射、示踪溶剂对照组,6只家兔/组)和治疗组(单次/多次耳缘静脉注射、自然恢复组、治疗溶剂对照组,6只家兔/组),雌雄各半。分离、培养、鉴定治疗组氟骨症家兔BMSCs,分别以单次及多次耳缘静脉移植回氟中毒家兔体内。示踪组中,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记BMSCs移植入家兔体内,免疫组化检测示踪BMSCs。治疗组中,60 d后,观察治疗前后骨骼X线影像学变化,以定量CT(QCT)测定家兔活体股骨骨密度,以酶联免疫吸附法(ELISA)测定家兔血清碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(BGP),以氟离子选择电极法测定家兔股骨骨氟含量,以HE染色观察股骨组织病理学改变并计算骨小梁面积。结果免疫组化结果显示多次耳缘静脉移植示踪组呈Brd U阳性表达,成骨细胞胞核呈淡黄色,而单次耳缘静脉移植示踪组、示踪溶剂对照组、示踪空白对照组、自然恢复组未见Brd U表达。多次耳缘静脉移植组治疗后X线影像显示股骨斑片状高密度影消失,紊乱骨小梁有所恢复;骨密度[(562.42±15.69)g/cm3]、ALP活力[(24.88±3.82)U/L]、BGP浓度[(1247.12±291.52)μg/L]、骨氟含量[(1699.16±528.69)mg/kg]、骨小梁面积[(28.71±1.88)Tb.Ar]均较自然恢复组下降[(635.11±93.42)g/cm3、(43.08±2.82)U/L、(3207.73±788.80)μg/L、(2557.65±173.90)g/kg、(38.52±2.81)Tb.Ar,P均<0.05],差异具有统计学意义;多次耳缘静脉移植组HE染色显示骨髓腔间隙增大,骨小梁数目减少,同时伴有部分新生成的粗细不均、排列整齐、骨髓间隙较均匀的正常骨小梁。而单次耳缘静脉移植组BMSCs未观察到有治疗效果。结论多次耳缘静脉自体BMSCs移植可有效修复氟骨症家兔受损骨组织,改善硬化型氟骨症病理损害,为BMSCs移植在氟骨症患者中的应用奠定了科学基础。

• 单位
  贵州医科大学; 公共卫生学院