渗透压诱导表达重组Clostridium thermosulfurogenes β-淀粉酶基因

作者：蒙健宗; 梁莲华; 周礼芹; 罗兆飞; 王青艳

来源：食品与发酵工业, 2011, (06): 6-10.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2011.06.002

• 渗透压启动子
• 诱导
• 热硫梭菌
• β-淀粉酶
• 表达 Pro U promoter
• induction
• Clostridium thermosulfurogenes
• β-amylase
• expression

以热硫梭菌Clostridium thermosulfurogenes基因组为模板,PCR扩增出β-淀粉酶基因;将该基因克隆到pET-22b(+)载体上,转入大肠杆菌BL21-SI,采用NaCl形成的高渗透压诱导表达。研究了不同诱导条件对重组菌产β-淀粉酶的影响,结果以菌体密度达到OD600为0.6,诱导剂NaCl浓度为0.6 mol/L,诱导温度为35℃最佳。重组菌以LBON为培养基分批发酵时,由于营养限制,菌体密度OD600仅为4.60,β-淀粉酶活力为118U/mL。采用pH-Stat分批补料发酵时,在菌体密度仅是分批发酵的2.35倍的条件下,得到6.12倍的产酶量,酶活力达722U/m...

• 单位
  广西大学; 广西科学院; 南宁邦尔克生物技术有限责任公司