MiR-34a对人脐静脉内皮细胞端粒酶活性的影响

作者：陈宇; 贺淑君; 米雪楠; 杨淑均; 李健; 惠汝太; 张伟丽

来源：中国分子心脏病学杂志, 2015, 15(04): 1397-1401.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2015.04.006

• MiR-34a
• 人脐静脉内皮细胞
• 内皮细胞衰老
• 端粒酶活性

目的研究miR-34a对脐静脉内皮细胞端粒酶活性及细胞衰老的影响。方法原代培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),通过传代培养,计算细胞群体倍增水平(Population doublings,PDL),得到年轻的内皮细胞(PDL8)及衰老细胞模型(PDL44),检测两组细胞SIRT1、h TERT、c-myc、p53及miR-34a表达水平的差异。并在PDL8细胞中过表达miR-34a,PDL44细胞中抑制miR-34a的表达,q PCR检测以上基因表达水平、TRAP-q PCR法检测端粒酶活性、SA-β-gal法显示细胞衰老状态的变化。结果 SIRT1、h TERT、c-myc基因在PDL44的HUVECs细胞中表达下调,p53及miR-34a表达上调。PDL8 HUVECs过表达miR-34a 48h后,SIRT1和h TERT表达分别下调43%和25%,TRAP-q PCR显示端粒酶活性降低21%,SA-β-gal法染色阳性细胞百分比由5.1%上升至8.7%;PDL44 HUVECs抑制miR-34a的表达,SIRT1和h TERT表达水平分别上调63%和30%,端粒酶活性上升20%,SA-β-gal法染色显示衰老细胞数量未见显著性变化。结论 Mi R-34a可以抑制内皮细胞SIRT1、h TERT基因表达及端粒酶活性,加速细胞衰老;抑制miR-34a可以上调SIRT1及h TERT表达,端粒酶活性升高;因此miR-34a可能通过抑制SIRT1表达和端粒酶活性的共同作用,参与内皮细胞衰老的调节。

• 单位
  心血管疾病国家重点实验室; 北京市海淀区妇幼保健院; 阜外心血管病医院