~(99m)Tc-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V活体检测兔肝癌细胞凋亡的研究

作者：侍作亮; 杨坤兴; 陈孝平; 张万广; 胡斌斌; 王峰; 张蕴春; 卞建民; 时开网

来源：中华实验外科杂志, 2013, (06): 1228-1231.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.06.042

• 癌,肝细胞
• ~(99m)Tc-联肼尼克酰胺-膜联蛋白V
• 脱噬作用
• VX-2

目的探讨~(99m)Tc-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)活体检测细胞凋亡的可行性。方法 ~(99m)Tc通过HYNIC标记Annexin V合成~(99m)Tc-HYNIC-Annexin V。建立兔VX-2肝癌模型。将10只新西兰大白兔随机分为2组,通过治疗剂量的化疗药物紫杉醇(PAC,n=6),同时建立对照组(C,n=4),分别予化疗前,化疗后24、48 h静脉注射~(99m)Tc-HYNIC-Annexin V,通过单光子发射计算体层摄影(SPECT)成像,选取肿瘤部位放射性计数(T)及腿部非肿瘤区部位放射性计数(NT),计算其比值(T/NT),进行半定量分析。最后1次显像后处死兔,取肿瘤组织,分别予免疫组织化学原位末端转移酶标记(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)分析组织细胞凋亡率,并与核医学检测结果比较,确定核医学检测结果与其是否相关。实验数据以SPSS I7.0软件进行t检验、方差和相关分析。结果 ~(99m)Tc-HYNIC-Annexin V标记率为95%以上,放化纯为95%以上。~(99m)Tc-HYNIC-Annexin V放射显像显示两组化疗前肿瘤部位放射性核素聚集T/NT为2.62±0.56、2.53±0.60。化疗后24 h及48 h对照组放射性核素聚集T/NT分别为2.72±0.70、2.62±0.66,紫杉醇干预组放射性核素聚集T/NT分别为6.43±0.97、6.64±1.15,与对照组、化疗前比较差异有统计学意义(P<0.01),24 h与48 h两组间放射性核素显像差异无统计学意义(P>0.05);对照组与紫杉醇组免疫组织化学分析肿瘤组织细胞TUNEL染色阳性率分别为4.00±0.81、13.50±2.74,流式细胞分析肿瘤组织细胞凋亡率分别为(7.83±1.11)%、(20.81±3.33)%。两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),放射性核素聚集程度与免疫组织化学分析组织细胞TUNEL阳性率和流式细胞分析组织细胞凋亡率的结果显著相关(r_(TUNEL)=0.747,P<0.05;r_(FCM)=0.909,P<0.01)。结论紫杉醇可以诱导兔VX-2肝癌细胞凋亡,~(99m)Tc-HYNIC-Annaexin V核素显像检测能够反映活体组织细胞凋亡,该方法能够在活体状态下检测细胞凋亡,化疗后24～48 h是放射性检测细胞凋亡的窗口时间。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 南京医科大学