重组人ZP3蛋白在大肠杆菌中的高效表达

作者：叶志华; 梁建庆

来源：生物技术, 2006, (06): 3-7.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2006.06.002

• 人ZP3蛋白
• 表达
• 大肠杆菌 human ZP3 protein
• expression
• E.coli

目的:用基因工程方法制备重组人ZP3蛋白。方法:以全长人ZP3 cDNA片段为模板,通过PCR扩增出编码人ZP3蛋白不同肽段的cDNA片段,然后将这些cDNA片段分别插入到表达载体pET-19b的NcoⅠ-BamHⅠ或NdeⅠ-BamHⅠ位点内,共构建成6种人ZP3蛋白非融合表达质粒(pEZP3-1~pEZP3-6)和3种人ZP3蛋白融合表达质粒(pEZP3-7~pEZP3-9)。将这9种表达质粒分别转化大肠杆菌Rosetta2(DE3)感受态细胞并选择出Apr转化子,将Apr转化子接种到NZCYM培养基中(含AP 100μg/mL),在35~37℃振荡培养到对数生长期,加入IPTG至1.0~...

• 单位
  广东省微生物研究所