基因筛选克隆表达原花青素降解酶及其酶解条件优化的初步研究

作者:苏惠娟; 刘丹; 闫堃; 张超; 王文雅; 袁其朋*
来源:北京化工大学学报(自然科学版), 2020, 47(04): 60-67.
DOI:10.13543/j.bhxbzr.2020.04.009

摘要

针对化学法制备低聚原花青素存在环保压力和副产物多等问题,研究了通过生物酶法降解高聚原花青素来制备低聚原花青素的方法。首先通过基因筛选方法筛选出SananA和EcnanA基因用于酶法降解高聚原花青素,将SananA和EcnanA基因连接在不同质粒载体表达蛋白的结果表明,SananA基因连接在pETDuet-1载体上时的蛋白表达效果较优。进而,利用纯化的SananA蛋白优化高聚原花青素降解条件,结果显示较优的酶解条件为温度50℃、pH=10、反应时间8 h,在此条件下原花青素单体积累量为35.67 mg/g,二聚体积累量为14.49 mg/g。

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