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摘要
背景:拉曼光谱在检测细胞状态方面相比于传统技术具有快速、非介入、非标记等特点,因此在生物医学领域中的应用正日益受到关注,但是该技术应用于干细胞检测的条件还有待进一步优化。目的:探索激光波长与光栅刻度密度对于干细胞拉曼光谱分辨率与收集时间等参数的影响,明确可以用于干细胞分析的拉曼光谱收集条件。方法:首先比较532,638,785 nm 3个波长激光及600,1 200,1 800 gr/mm 3种光栅刻度密度条件对人间充质干细胞与人胚胎干细胞拉曼光谱的影响;之后比较这2个条件不同组合得到的拉曼光谱的光谱分辨率与收集时间,选择出最佳的组合条件;最后使用选出的最佳条件结合主成分分析方法比较胚胎干细胞与间充质干细胞拉曼光谱的差异以验证优化条件的适用性。结果与结论:(1)激光波长与光栅刻度密度均会不同程度影响干细胞拉曼光谱的峰强,进而影响特征性拉曼峰之间的比值;(2)785 nm波长激光与1 200 gr/mm光栅刻度密度条件组合是最适合收集条件;(3)对比分析胚胎干细胞与间充质干细胞的拉曼光谱图,提示胚胎干细胞具有更高的核酸含量,而间充质干细胞在一些蛋白和脂类含量上更为丰富。
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单位中国医学科学院北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室
