摘要
为探究山东银莲花在全光照的山顶灌丛和阴暗的针阔混交林下两种不同生境中的生态适应机制,并开发其EST-SSR分子标记,该研究利用Illumina高通量测序技术对开花期的山东银莲花叶片进行转录组测序,获取其功能注释和差异表达基因。结果表明:(1)转录组测序共得到53 536条Unigenes序列,其中27 448条成功获得注释。(2)差异表达基因5 635个,1 600个在山顶灌丛的山东银莲花中上调表达,其余4 035个下调表达。有2 460个差异表达基因注释到GO数据库2 533个三级条目中,1051个差异表达基因注释到KEGG数据库的113条代谢通路中。(3)山东银莲花适应于异质生境的代谢通路主要涉及光合作用-天线蛋白通路和类黄酮生物合成通路,光合作用-天线蛋白通路中lhca5基因上调表达,lhca1-3基因下调表达,类黄酮生物合成通路中chs、c4h、f3’h、f3h、fls、ans、chi、ccoaomt和hct基因均上调表达。(4)从山东银莲花转录组数据中共搜索获得7 146个SSR位点分布于6 006条Unigenes序列中,共计106种重复基序,优势重复基序为单核苷酸重复。设计合成100对ESTSSR引物中共有68对引物具有有效性,其中11对具有多态性,共扩增24个多态性片段。该研究结果有助于更深入地理解山东银莲花在不同生境中的适应性调节机制,并首次开发其EST-SSR分子标记填补该方面的空白,为该生物的保护和利用提供了重要的分子标记资源。
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单位烟台大学; 生命科学学院