摘要

目的 观察多房棘球蚴组织蛋白体外刺激肝星状细胞(HSC)-LX2后的细胞形态、胞内脂滴和细胞分泌α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化。方法 无菌取多房棘球蚴保种小鼠体内的多房棘球蚴组织,超声裂解法提取多房棘球蚴组织蛋白,以0.125 mg/ml终浓度加至体外培养的HSC-LX2中刺激24、48、72、96和120 h后,取细胞进行油红O染色,光学显微镜和荧光显微镜下观察细胞形态和胞内脂滴分布。提取刺激48、72、96和120 h后的HSC-LX2总蛋白,Western blotting检测细胞内α-SMA的相对表达量变化。结果 光学显微镜下可见,多房棘球蚴组织蛋白刺激24~96 h后,HSC-LX2细胞形态由多边形逐渐变为长梭形,胞内脂滴数量增加且脂滴分布在细胞核周围,脂滴颗粒逐渐变大,颜色由浅黄色变为红色;刺激120 h后,绝大部分细胞都变成长梭形,多数细胞内脂滴数量有所减少且体积变小,脂滴由红色变为黄色。荧光显微下可见,刺激不同时间的HSC-LX2胞内有红色荧光的脂滴颗粒围绕在细胞核周围,荧光信号不随着照射次数的增加而降低。Western blotting分析结果显示,HSC-LX2胞内α-SMA相对表达量随刺激时间延长逐渐升高,刺激至96 h时最高,为4.846±0.741,至120 h时下降至2.420±0.349,但均高于对照组的(t=8.988、7.045,均P <0.01)。结论 多房棘球蚴组织蛋白体外可促进HSC-LX2活化,细胞形态发生改变,胞内脂滴数量和体积均先升高后下降,胞内α-SMA蛋白表达呈现先升高后降低的趋势。