摘要
本文建立了一种有效捕获和快速检测牛源A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的免疫检测方法。该方法将本实验室筛选的一株单克隆抗体(McAb)作为捕获探针偶联到磁珠表面构建免疫磁珠(IMB),并用于特异性捕获牛源A型Pm,辣根过氧化物酶(HRP)标记的另一株McAb作为检测探针与捕获的牛源A型Pm相互作用,建立了一种基于磁珠的"双抗夹心"免疫显色方法实现该菌的快速检测。在最优条件下,牛源A型Pm在1.0×105~1.0×107 CFU/mL范围内与信号强度呈良好的线性关系(R2=0.99),检测限(S/N=3)为1.0×105 CFU/mL。本方法具有良好的特异性和重现性,对模拟实际样品的检测结果取得了令人满意的效果。
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单位华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 生命科学技术学院