种传番茄溃疡病菌直接PCR和免疫捕捉PCR检测方法之比较

作者：闵现华; 韩跃武; 刘箐; 王军平; 刘雅莉; 文朝慧; 刘姝彤; 宋蕤; 施颖波

来源：植物检疫, 2010, (04): 12-16.

DOI：10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2010.04.003

• 番茄溃疡病
• 番茄种子
• 直接PCR
• 免疫捕捉PCR bacterial canker of tomato
• tomato seeds
• direct-PCR
• immunocapture-PCR

用PBS和种子研磨后的普通病原提取液稀释番茄溃疡病菌纯菌液,并以梯度纯菌液和带菌种子提取液作为模板进行直接PCR和免疫捕捉PCR,比较2种方法在纯菌液和带菌种子提取液中的检测灵敏度,找到一种高特异性、高灵敏度、简便快捷的方法用于检测番茄种子携带的番茄溃疡病菌。结果显示在纯菌液中直接PCR灵敏度为104cfu/mL,免疫捕捉PCR为102cfu/mL;在带菌种子提取液中直接PCR灵敏度为106cfu/mL,免疫捕捉PCR为104cfu/mL;免疫捕捉PCR比直接PCR灵敏度高100倍,尤其在实际种子检测中优势更明显,而且检出时间短,重复性好。

• 单位
  甘肃农业大学; 甘肃出入境检验检疫局; 兰州大学