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摘要
为建立一种简单、快速检测病毒性神经坏死病毒（VNNV）的重组酶介导等温扩增（RAA）方法，本研究通过比较分析VNNV RNA2基因保守序列，设计引物与探针。经过筛选优化，建立了VNNV实时荧光RT-RAA快速检测方法。结果显示，该方法在39℃恒温反应15 min即可快速、特异性地检测出VNNV，并与常见的鱼类RNA病毒核酸不发生交叉反应，其对标准质粒的检测下限为2.6×10～1copies/μL，组内和组间变异系数均小于5%。利用该方法对48份实验室及送检样品进行检测，结果与实时荧光RT-PCR的一致。上述结果表明，本研究建立的检测方法操作简单，特异性强，敏感性高，结果可靠，且不依赖于复杂的仪器，可适用于现场和实验室对VNNV的快速检测。
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