摘要
目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制.方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3和细胞周期相关因子CHKI、CDK2 mRNA和蛋白水平的表达.结果:(1)MTT结果:DB可抑制RM-1细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察和流式细胞术检测:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G1期;(3)RT-PCR结果:DB(2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L)分别作用RM-1细胞12 h、24h、48 h后,p53、CHKI、(gRIM-19 mRNA的含量明显高于对照组,CDK2、STAT3 mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(4)Western blotting结果:DB(2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L)分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后,P53、GRIM-19蛋白表达水平高于对照组,而CDK2蛋白表达水平则低于对照组.结论:DB可抑制RM-1细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调,CDK2表达下降有关,影响了G1期进入S期,同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程.
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单位吉林大学; 基础医学院