摘要

目的评价内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在线粒体分裂中的作用。方法将肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×105/ml接种于6孔板,采用随机数字表法将其分为6组(n=10):空白对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CORM-2组(L+CO组)、LPS+LY294002组(L+LY组)、LPS+无活性的CORM-2(iCORM-2)组(L+iCO组)、LPS+二甲基亚砜组(L+D组)。L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组采用10μg/ml LPS孵育24 h;于LPS孵育前1 h时,L+CO组、L+LY组、LPS+iCO组分别加入CORM-2 100μmol、LY294002 25μg、iCORM-2 100μmol;L+D组于LPS孵育前1 h加入0.1%二甲基亚砜100μmol。细胞孵育结束后,采用ELISA法测定培养液TNF-α和IL-6浓度。采用Western bolt法测定细胞磷酸化Akt(p-Akt)、血红素加氧酶-1(HO-1)、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂相关蛋白1(Fis1)的表达。结果与C组比较,L组、L+CO组、L+LY组、L+iCO组和L+D组培养液TNF-α和IL-6浓度升高,p-Akt、HO-1、Drp1和Fis1表达上调(P<0.05)。与L组比较,L+CO组TNF-α和IL-6浓度降低,p-Akt和HO-1表达上调,Drp1和Fis1表达下调,L+LY组TNF-α和IL-6浓度升高,p-Akt和HO-1表达下调,Drp1和Fis1表达上调(P<0.05)。结论内毒素攻击大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞时PI3K/Akt信号通路激活可抑制线粒体分裂。