核因子-κB抑制剂对胶质瘤干细胞放疗增敏的作用

作者：刘俊峰; 谢涛; 刘羽; 罗龙军; 徐成; 沈璐; 雷霆; 叶飞^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(09): 1684-1686.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2018.09.031

• 胶质瘤
• 肿瘤干细胞
• 四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯
• 核因子-κB
• 放疗增敏

目的探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对胶质瘤干细胞(GSLC)放疗增敏的作用和机制。方法用无血清悬浮培养方法培养胶质瘤干细胞U87-sph,并用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定干细胞标志物的表达。用Western blot比较放疗后不同时间点U87与U87-sph中NF-KB及p-NF-κB表达。用膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙锭(PI)双染方法检测单独PDTC、单独放疗、PDTC联合放疗等不同分组的U87和U87-sph的凋亡率。采用Western blot检测U87-sph在PDTC联合放疗时凋亡相关蛋白及NF-KB通路蛋白的表达。结果 RT-PCR检测U87-sph中干细胞标志物的表达较其亲本细胞株增加。Western blot结果显示X射线照射后不同时间点,U87-sph中p-NF-KB/p65表达明显增加(P=0.001),且呈时间依赖性。而在U87细胞中变化不明显(P=0.059)。U87-sph的单独PDTC处理组,单独放疗组和PDTC联合放疗组的凋亡率与对照组比较依次增加(1. 10±0. 07)倍(P=0.651)、(1.49±0.12)倍(P=0.009)、(3.20±0. 19)倍(P=0.005)。PDTC联合放疗组的凋亡率与单独PDTC组、单独放疗组比较均明显增加(P=0.003,P=0. 004)。Western blot结果显示U87-sph的PDTC联合放疗组中剪切型半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8与剪切型Caspase-3表达均明显增加;U87-sph在单独PDTC作用时,p-NF-κB、p-抑制因子κB(p-IκB)表达均降低,单独放疗时,两者均增强,而在PDTC联合放疗时,两者表达是降低的;U87-sph中细胞FLICE抑制蛋白(cFLIP)的表达趋势与p-NF-κB相同。结论放疗后GSLC中NF-κB通路明显激活。PDTC可以通过抑制放疗后GSLC中NF-κB通路的激活从而诱导GSLC凋亡。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院