细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的表达及抗原性分析

作者：李航; 李文卉; 李永光; 苟惠天; 王艳华; 张德林; 贾万忠; 史大中; 付宝权

来源：中国人兽共患病学报, 2008, (08): 708-711.

• 细粒棘球绦虫
• 硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)
• 基因表达
• 抗原性 Echinococcus granulosus
• thioredoxin peroxidase
• gene expression
• antigenicity

目的在原核系统表达并初步鉴定细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因重组蛋白的抗原性。方法对已构建的重组质粒pMD-18T-EgTPx进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-EgTPx,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Western-blot方法和ELISA鉴定重组EgTPx蛋白的抗原性。结果构建的重组表达质粒pET30...

• 单位
  基础医学院; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 兰州大学