摘要

目的 研究迷迭香酸(RA)对过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19衰老模型的影响,并探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在其中的作用。方法 分别用0、20、40、80μmol/L的RA预处理ARPE-19细胞48 h后,加入200μmol/L的H2O2诱导细胞衰老模型,细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞活性,筛选RA的最佳剂量。将ARPE-19细胞分为对照组(CG)、模型组(MG)、RA组(80μmol/L),再次按照上述方法处理细胞。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)法检测细胞衰老,Western Blot法检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子2A、1A(P16、P21)、NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)表达。结果 (1)RA最佳剂量:80μmol/L的RA干预后ARPE-19细胞活性最高,作为最佳剂量。(2)细胞衰老:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞衰老率增加(t=8.642,P=0.000);与MG组比较,RA组ARPE-19细胞衰老率降低(t=7.585,P=0.000),差异均有统计学意义。(3)NLRP3炎症小体通路关键蛋白:与CG组比较,MG组ARPE-19细胞P16、P21、NLRP3、ASC、Caspase-1表达升高(tP16=8.483,tP21=8.111,tNLRP3=6.976,tASC=11.550,tCaspase-1=7.300,均P=0.000);与MG组比较,RA组ARPE-19细胞P16、P21、NLRP3、ASC、Caspase-1表达降低(tP16=4.342,P=0.004;tP21=4.580,P=0.005;tNLRP3=4.022,P=0.007;tASC=4.243,P=0.005;tCaspase-1=4.434,P=0.004),差异均有统计学意义。结论 RA预处理可以减轻H2O2诱导的ARPE-19细胞衰老,该效应可能与RA下调H2O2刺激下NLRP3炎症小体的表达有关。

  • 单位
    西安医学院第一附属医院

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