摘要
目的制作家兔小腿骨筋膜室综合征动物模型,早期使用神经生长因子(nerve growth factor,NGF)进行神经保护和修复,来实现对骨筋膜室综合征神经损伤的早期治疗。方法实验于2016年9月至2017年12月在南通大学动物实验室完成。24只家兔分为三组:对照组8只,损伤未注射NGF组8只,损伤注射NGF组8只。采用止血带法制作筋膜室综合征动物模型,用止血带紧密包扎家兔一侧小腿8h后松解。测量松开止血带后4h、8h、1d、3d、5d、7d、2周、4周的兔腿间隔筋膜室内压力。通过蛋白印迹试验,了解兔骨筋膜室综合征神经损伤后的神经细胞增殖变化。损伤注射组在模型制作成功后立即局部注射神经生长因子,2mL生理盐水溶解后肌肉注射,每次30μg,一天一次,连续4周。采集实验兔(对照组)、损伤后5d(损伤未注射组)、损伤后5d(损伤注射组)的兔后腿神经标本,分别进行免疫荧光实验,HE染色分析。结果松开止血带后,伤侧小腿迅速肿胀,在4h后筋膜室内压已达到(2.0±0.2)kPa以上.并在1d后达到峰值,之后逐渐下降。Western blot显示,PCNA在对照组呈现出低表达,在兔骨筋膜室综合征4h后开始上调,5d时表达达到最高峰(P<0.05),然后,PCNA逐渐下降。HE染色发现:未注射NGF组在损伤后5d,可见神经纤维断裂、水肿、空泡、形状不规则的组织形态,而给予NGF注射的实验组在同一时间点的组织形态要明显好于未注射组。荧光双标显示结果表明兔骨筋膜室综合征后注射NGF可促进神经的恢复,可以通过增加早期施旺细胞增殖来实现。结论该模型能较好的模拟临床实际,病理指标的变化能客观地反映病情严重程度,证明骨筋膜室综合征早期即可发生神经损伤。早期局部应用NGF对骨筋膜室综合征神经损伤的治疗具有明显作用。
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单位南通市第一人民医院