血红素氧合酶1介导阿托伐他汀在巨噬细胞极化和胆固醇蓄积中的作用

作者：邓锐; 黄科铭; 罗建; 陈功; 冯健; 黄维义; 魏刚^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(01): 62-67.

• 阿托伐他汀
• 动脉粥样硬化
• 巨噬细胞极化
• 泡沫细胞
• 血红素氧合酶1
• 自噬
• 氧化低密度脂蛋白

背景：研究表明，阿托伐他汀可以上调血红素氧合酶1表达，增强细胞抗炎症及抗氧化损伤能力。但阿托伐他汀是否可以通过诱导血红素氧合酶1表达调控巨噬细胞极化、抑制炎症、减少胆固醇蓄积尚不明确。目的：探讨阿托伐他汀通过诱导血红素氧合酶1表达对氧化修饰型低密度脂蛋白刺激的RAW264.7巨噬细胞极化、炎症状态及胆固醇水平的影响和相关机制。方法：先将体外培养RAW264.7细胞随机分为6组，分别给予不同浓度的阿托伐他汀孵育24 h，检测血红素氧合酶1蛋白表达量及细胞活性，摸索阿托伐他汀的最适剂量用于后续研究。另将RAW264.7细胞随机分为对照组、阿托伐他汀组、血红素氧合酶1抑制组，分别用纯培养基、阿托伐他汀20μmol/L及阿托伐他汀20μmol/L+锌原卟啉Ⅸ10μmol/L预先孵育细胞24 h，再加入50 mg/L的氧化修饰型低密度脂蛋白孵育48 h。流式细胞术检测巨噬细胞极化结果；ELISA法检测转化生长因子β、白细胞介素10、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等炎症因子的分泌水平；Western blot检测血红素氧合酶1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、P62、PPARγ、ABCA1的表达量；氧化酶法检测细胞内胆固醇含量并用油红O染色评价胞内脂滴的蓄积程度。结果与结论：(1)阿托伐他汀可呈剂量依赖性诱导巨噬细胞血红素氧合酶1蛋白表达；(2)氧化修饰型低密度脂蛋白可诱导巨噬细胞主要向M1极化并分泌促炎因子，增加胞内胆固醇蓄积；(3)与对照组相比，阿托伐他汀干预后巨噬细胞血红素氧合酶1蛋白表达增加，细胞转向M2型极化且主要分泌转化生长因子β、白细胞介素10等抗炎因子，同时，PPARγ、ABCA1、LC3II/I等反映胆固醇外排及自噬的信号分子表达增加，胞内胆固醇及脂滴含量均显著减少(P﹤0.05)；(4)同步加入锌原卟啉Ⅸ预处理的血红素氧合酶1抑制组则显著逆转了阿托伐他汀组的上述改变；(5)结果表明，阿托伐他汀可能通过上调血红素氧合酶1的表达促进氧化修饰型低密度脂蛋白刺激的巨噬细胞向M2型极化、抑制炎症，并通过上调PPARγ/ABCA1信号通路和增强自噬等增加胞内胆固醇流出，降低细胞内脂质蓄积。

• 单位
  西南医科大学