光路系统的优化配置在多色流式细胞术实验方案设计中的应用

作者：付伟超; 梁昊岳; 于文颖; 王浩雨; 刘二涛; 高瀛岱^*

来源：医疗卫生装备, 2021, 42(05): 10-32.

DOI：10.19745/j.1003-8868.2021091

• 多色流式细胞术
• 光路系统
• 滤光片
• 荧光通道
• 造血干祖细胞

目的:基于流式细胞仪光路系统的硬件配置情况,探讨多色流式细胞术实验方案的优化设计。方法:选用6～8周B6小鼠的骨髓细胞作为实验材料,在已有流式抗体的基础上,通过变更BD AriaⅢ流式细胞仪中的滤光片,分别检测各荧光通道信号的相对变异系数%rCV和荧光强度中位值(median of fluorescence intensity,MFI)以及小鼠骨髓中的造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)、造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell,HPC)和多能祖细胞(multipotent progenitor cell,MPP)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果:通过优化光路系统配置,滤光片变更前后各荧光通道的%rCV无明显差异;HSC、HPC、MPP等细胞亚群在PerCP-Cy5.5通道的MFI(ROS水平)均增大;各亚群PerCP-Cy5.5通道的荧光信号(ROS水平)整体右移,实现了多参数流式分析。结论:在多色流式细胞术实验方案设计中,如相关荧光素抗体搭配受限,可通过灵活搭配使用流式细胞仪中的滤光片,合理优化光路系统的硬件配置,达到完成多色流式细胞术检测的目的。

• 单位
  中国医学科学院血液病医院; 北京协和医学院; 中国医学科学院血液学研究所; 实验血液学国家重点实验室