乙型脑炎病毒微滴式数字PCR检测方法的建立

作者：薛晓宁; 徐翮飞; 张娟; 侯伟; 张瑾^*

来源：口岸卫生控制, 2021, 26(05): 60-63.

• 乙型脑炎病毒
• 微滴式数字PCR
• 检测

目的建立乙型脑炎病毒微滴式数字PCR (droplet digital PCR, ddPCR)检测方法。方法根据乙型脑炎病毒基因的NS3序列设计特异性引物和TaqMan探针,用于ddPCR和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)。优化ddPCR的退火温度、引物和探针浓度后,比较ddPCR和qPCR灵敏度和重复性,并用多种虫媒病毒进行特异性验证。结果该方法特异性良好,灵敏度可以达到16.1 copies/μL,重复性良好。结论本研究建立的ddRT-PCR能够高度敏感地检测乙型脑炎病毒核酸,将该方法用于临床乙型脑炎病毒感染的检测,可提高检测的准确性。