间充质干细胞来源外泌体通过microRNA-210发挥对H2O2诱导的心肌损伤的保护作用

作者：郝媛媛; 马爱群^*; 吴冠吉; 李涛; 胡建华

来源：临床和实验医学杂志, 2020, 19(24): 2577-2581.

• 间充质干细胞
• 外泌体
• microRNA-210
• 心肌细胞损伤
• CASP8AP2通路

目的研究间充质干细胞(MSC)外泌体经通过microRNA-210发挥H2O2诱导的心肌损伤的保护作用及其机制。方法应用H2O2溶液诱导建立H9c2心肌细胞的氧化应激损伤模型,采用噻唑蓝(MTT)检测其对H9c2细胞生存率的影响。应用实时定量PCR检测不同浓度H2O2溶液对MSC外泌体中microRNA-210表达水平的影响。应用慢病毒感染建立microRNA-210 precursor、microRNA-210 inhibitor组,检测microRNA-210对H2O2诱导的H9c2心肌细胞存活率的影响。分别采用0.5 mmol/L的H2O2处理和不用H2O2处理处理microRNA-210 precursor组、microRNA-210 inhibitor组和H9c2对照组细胞24 h,再应用聚合酶链式反应(PCR)法检测各组细胞中的CASP8AP2、caspase-8和caspase-3基因的mRNA的相对表达。结果 H2O2可降低H9c2心肌细胞的生存率并诱导MSC外泌体中microRNA-210表达水平增加,其作用强度均呈浓度依赖性(P <0.05)。microRNA-210 precursor组的H9c2心肌细胞生存率[(0.66±0.16)%]较未转染组H9c2细胞对照组[(0.41±0.10)%]显著增加(P <0.01),microRNA-210 inhibitor组的生存率[(0.29±0.07)%]较H9c2细胞对照组显著降低(P <0.001)。与H9c2细胞对照组(2.93±0.56、2.22±0.27、2.10±0.36)相比,microRNA-210-precursor组CASP8AP2、caspase-8和caspase-3 mRNA的相对表达(1.01±0.13、1.00±0.11、1.01±0.12)均显著降低,H9c2细胞+H2O2组以上指标[(7.22±1.32、6.10±1.03、5.98±0.44)]均表达均显著增加,H9c2细胞+H2O2组也较microRNA-210-precursor组显著升高(P <0.05);与H9c2+H2O2组相比,microRNA-210-precursor+H2O2组(3.09±0.60、2.25±0.29、2.12±0.31) CASP8AP2、caspase-8和caspase-3 mRNA的相对表达均显著降低(P <0.05)。结论 H2O2可诱导H9c2心肌细胞损伤,并促进外泌体中microRNA-210表达的增加,而过表达microRNA-210可抑制H2O2诱导的心肌细胞的损伤,因此microRNA-210发挥抗心肌细胞损伤作用的可能机制是通过抑制CASP8AP2通路相关基因的表达而实现的。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 西安市中心医院