电针通过抑制PDK1/Akt/HCN4通路改善大鼠神经源性尿潴留

作者：李正飞; 张任; 赵国瑞; 匡尧^*

来源：针刺研究, 2023, 48(10): 969-1000.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20221084

• 电针
• 神经源性尿潴留
• 3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1/蛋白激酶B通路
• 超极化激活环核苷酸门控离子通道4

目的：以3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)/蛋白激酶B(Akt)/超极化激活环核苷酸门控离子通道4(HCN4)通路为切入点，探究电针治疗大鼠神经源性尿潴留的分子机制。方法：实验选取SD雌性大鼠，采用改良Hassan Shaker脊髓全断法建立逼尿肌无力型尿潴留大鼠模型，并按随机数字表法随机分为模型组、电针组、PDK1抑制剂组、HCN4阻断剂组、电针+HCN4阻断剂组，每组20只，另取20只大鼠作为假手术组。电针组、电针+HCN4阻断剂组取大鼠“中极”“中髎”电针治疗20 min,1次/d,PDK1抑制剂组隔天1次腹腔注射OSU-03012(20 mg/kg),HCN4阻断剂组隔天1次腹腔注射伊伐布雷定（10 mg/kg），以上治疗均持续10 d。多通道生理记录仪检测大鼠尿流动力学指标；肌条实验检测逼尿肌兴奋性；HE染色观察膀胱形态学变化；免疫荧光双染法检测膀胱组织HCN4与酪氨酸蛋白激酶KIT(C-Kit)阳性表达；Western blot法检测膀胱组织PDK1/Akt/HCN4通路蛋白及热休克蛋白27(HSP27)表达。结果：与假手术组相比，模型组大鼠出现排尿功能障碍，漏尿点压力、离体逼尿肌自发收缩频率、膀胱组织C-Kit荧光强度、HCN4+/C-Kit+共表达、HCN4及磷酸化（p）-HSP27/HSP27蛋白表达降低（P<0.05），膀胱最大容量及顺应性、离体逼尿肌收缩时最小张力、膀胱组织PDK1及p-Akt/Akt蛋白表达升高（P<0.05）；与模型组相比，电针组、PDK1抑制剂组大鼠以上指标均逆转（P<0.05）；与电针组相比，电针+HCN4阻断剂组和HCN4阻断剂组大鼠排尿功能障碍严重，漏尿点压力、自发收缩频率、C-Kit荧光强度、HCN4+/C-Kit+共表达、HCN4及p-HSP27/HSP27蛋白表达降低（P<0.05），膀胱最大容量及顺应性、离体逼尿肌收缩时最小张力、膀胱组织PDK1及p-Akt/Akt蛋白表达升高（P<0.05）。HE染色示模型组大鼠膀胱上皮组织脱落、层次紊乱，膀胱壁细胞空泡化、黏膜层及肌层中性粒细胞浸润等病理损伤明显，电针组及PDK1抑制剂组有所减轻，HCN4阻断剂组较模型组加重，电针+HCN4阻断剂组上述病理损伤较电针组严重。结论：电针刺激“中髎”“中极”可能通过抑制PDK1/Akt通路活化，促进HCN4介导的逼尿肌兴奋性收缩、排尿电信号活化，从而改善神经源性尿潴留大鼠排尿功能障碍。

• 单位
  天津中医药大学第一附属医院