人CD24分子成熟多肽的原核表达及抗体制备

作者：林洁; 马岚; 张士煜; 管常东; 李旋; 吕琦

来源：中国生物工程杂志, 2011, (12): 39-45.

DOI：10.13523/j.cb.20111207

• CD24
• 成熟多肽核心蛋白
• 基因克隆
• 融合蛋白
• 多克隆抗体 CD24 Mature polypeptides Gene cloning Fusion protein Polyclonal antibody

目的:为获得抗人CD24分子成熟多肽核心蛋白(hCD24N)的多克隆抗体。方法:制备CD24表达阳性的人肿瘤细胞cDNA,采用PCR法扩增hCD24N的编码基因,构建pGEX-KGV-hCD24N原核表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),乳糖诱导表达;经GST亲和柱层析、SDS-PAGE和Western blotting制备并鉴定纯化的GST-StraptagII-hCD24N融合蛋白;免疫新西兰大白兔制备抗血清并用rProtein A亲和柱层析纯化多克隆IgG抗体;用间接ELISA法测定抗体效价,Western blotting鉴定抗体特异性,同时采用细胞免疫荧光检测技术对抗体的特异性和...

• 单位
  清华大学深圳研究生院; 云南大学