肝癌靶向性SEA基因重组腺病毒载体的构建及体外生物学活性鉴定

作者：司少艳; 隋延仿; 张秀敏; 李侠; 冯凯; 韩瑞刚

来源：中国肿瘤, 2007, (07): 536-540.

• 葡萄球菌肠毒素A
• 超抗原
• 腺病毒
• 构建 staphylococcal endotoxin A
• superantigen
• adenovirus
• construction

[目的]构建肝癌靶向性葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因重组腺病毒载体。[方法]首先利用现有的腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShuttle-CMV,构建新的不带CMV增强子/启动子而带有polyA加尾信号穿梭质粒,命名为pShuttle2。将AFP增强子、启动子及SEA基因分别从已构建的pKS-EP载体和pMD18-T-SEA载体上,亚克隆至pShuttle2中,再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coliBJ5183。以获得的重组子转染HEK293细胞后制备重组腺病毒,然后感染高表达AFP的肝癌细胞系Hepa1-6和不表达AFP的黑色素瘤细胞系B16、成纤维细胞系NIH3T3。采用...

• 单位
  第四军医大学; 中国人民解放军第306医院