miR-17-3p对角质形成细胞增殖的影响

作者：周霁^*; 李东升; 许斌; 张艺; 陈可

来源：中国临床药理学杂志, 2020, 36(19): 3095-3098.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2020.19.035

• 银屑病
• 角质形成细胞
• miR-17-3p
• 靶向负调控缺氧诱导因子1α

目的研究miR-17-3p在银屑病组织来源的角质形成细胞中的表达及其对角质形成细胞增殖的影响和机制。方法分离培养银屑病和正常皮肤组织来源的角质形成细胞,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定miR-17-3p表达。在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中分别转染mimics control、miR-17-3p mimics、inhibitor control、miR-17-3p inhibitor,命名为第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组。在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中共转染miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1和miR-17-3p mimics、pcDNA 3.1-缺氧诱导因子1α(HIF-1α),分别命名为第5转染组和第6转染组;在正常皮肤组织来源的角质形成细胞中共转染miR-17-3p inhibitor、siRNA control和miR-17-3p inhibitor、HIF-1αsiRNA,分别命名为第7转染组和第8转染组。用噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞角蛋白10(Keratin10)、细胞角蛋白14(Keratin14)和HIF-1α蛋白蛋白表达。结果 miR-17-3p在银屑病来源的角质形成细胞、正常皮肤组织来源的角质形成细胞中表达量分别为0.35±0.05和1.00±0.09,差异有统计学意义(P<0.05)。第1,2,3,4,5,6,7,8转染组细胞存活率分别为(100.00±10.23)%,(74.29±6.81)%,(100.00±9.80)%,(136.51±12.07)%,(75.61±8.15)%,(96.32±8.12)%,(137.54±12.05)%和(110.32±10.20)%;miR-17-3p mRNA水平分别为1.00±0.11,3.26±0.28,1.00±0.10,0.25±0.03,3.22±0.23,2.15±0.15,0.26±0.02和0.84±0.08;Keratin10蛋白相对表达量分别为1.00±0.09,1.45±0.13,1.01±0.15,0.48±0.06,1.48±0.14,0.86±0.08,0.45±0.05和0.89±0.09;Keratin14蛋白相对表达量分别为1.00±0.12,3.25±0.32,1.02±0.11,0.66±0.05,3.01±0.32,1.26±0.14,0.70±0.10和2.25±0.23;HIF-1α蛋白相对表达量分别为1.00±0.08,0.45±0.04,1.00±0.11,2.03±0.23,0.48±0.06,0.96±0.10,1.99±0.17和1.02±0.13。上述指标,第2转染组与第1转染组比较,第4转染组与第3转染组比较,第6转染组与第5转染组比较,第8转染组与第7转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 miR-17-3p在银屑病组织来源的角质形成细胞中表达下调,其可以促进角质形成细胞增殖并改变细胞分化状态。

• 单位
  武汉市第一医院