苯酚羟化酶基因工程菌表达优化及特性研究

作者：曹湘禹; 黄益养; 时胜男; 马桥; 李新亮; 孔春雷; 沈娥; 曲媛媛

来源：环境科学学报, 2012, (07): 1549-1556.

DOI：10.13671/j.hjkxxb.2012.07.001

• 苯酚
• 苯酚羟化酶
• 表面响应法
• 底物多样性 phenol
• phenol hydroxylase
• response surface methodology
• substrate spectra

利用表面响应法优化苯酚羟化酶基因工程菌(PH_IND)的生长条件(种龄、接种量)及表达条件(诱导OD600、IPTG浓度、诱导时间、诱导温度),并对其粗酶特性进行考察.实验结果表明,菌株PH_IND的最佳生长条件及表达条件为:种龄7.19h,接种量1.39%,诱导OD6000.54,IPTG浓度0.19mmol·L-1,诱导时间2.37h,诱导温度35℃,此时,苯酚羟化酶最大酶活力为0.6167U·mg-1.粗酶特性分析表明,苯酚羟化酶的最适pH和温度分别为8.0和40℃.Ba2+、Fe3+、Hg2+、Pb2+对苯酚羟化酶有明显促进作用,而Ca2+、Co2+、Cu2+、Mg2+、Mn2+对苯酚...

• 单位
  哈尔滨工业大学; 城市水资源与水环境国家重点实验室; 大连理工大学