改良消化富集法提高小鼠精原细胞染色体制备效率的研究及应用

作者：张静; 程东; 姚文环; 杨非; 唐慧; 孙昌华; 颜燕; 周雯^*; 李慧^*

来源：中国比较医学杂志, 2023, 33(08): 75-85.

• 改良消化富集法
• 小鼠精原细胞
• 染色体畸变
• 玛咖

目的 建立一种改良的小鼠精原细胞染色体畸变试验方法，以获得大量结构清晰的中期分裂相精原细胞利于阅片，并将改进后的方法应用于玛咖的致突变实验。方法 选取雄性ICR小鼠30只，随机分为6组，每组5只，将原染色体制备方法增加了剪碎曲细精管及精原细胞消化富集，采用1.5 mg/mL的胶原酶，35℃消化15 min,每隔3 min搅拌1次，消化富集精原细胞，经低渗、固定、滴片，封片后镜检阅片，同时与国标方法所制备的滴片进行比较阅片。结果 改良消化富集法所制备的滴片背景清晰，染色体分散良好，收缩适中，易于观察。分析每只动物100个中期分裂相精原细胞所需观察的高倍视野数(25±3.9)与国标方法组(75±5.6)比较明显减少(P<0.01),精原细胞有丝分裂指数(18.04±2.47)与国标方法组(8.83±2.04)比较明显增加(P<0.01);环磷酰胺处理组染色体畸变率(15.40±2.30)与空白对照组(3.60±1.14)比较显著增加(P<0.01);玛咖各剂量组染色体畸变率与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论 改良消化富集法能明显提高精原细胞富集效率及实验成功率，可获得大量分散良好、背景清晰的中期分裂相精原细胞，明显优于国标方法；在本次实验条件下，玛咖对小鼠精原细胞染色体无致突变作用。

• 单位
  山东省疾病预防控制中心