PML-RARα和hGM-CSF双基因表达载体的构建

作者：胡刚; 李扬秋; 陈少华; 杨力建; 周羽竝; 汤冀

来源：暨南大学学报(自然科学与医学版), 2006, (06): 773-778.

DOI：10.3969/j.issn.1000-9965.2006.06.002

• PML-RARα基因
• hGM-CSF基因
• 早幼粒细胞白血病
• DNA疫苗

目的:构建急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα基因与人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因真核双表达载体,为利用DNA疫苗治疗APL奠定基础。方法:利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段,通过PCR从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点(MCS)A和B中,构建真核双表达载体。利用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性。结果:NheI/M luI和XbaI/SalI双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,且序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。结论:成功构建了含有PML-RARα基因及hGM-CSF基因的真核双表达载体。

• 单位
  暨南大学