聚核糖性死亡在低氧复合丙泊酚致PC12细胞损伤中的作用

作者：王维萍; 高雯; 陈杭; 刘玲; 涂生芬; 杨飞^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(10): 1025-1032.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202111024

• 低氧
• 丙泊酚
• 大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞
• 聚核糖性死亡

目的 探讨聚核糖性死亡在低氧环境下丙泊酚致PC12细胞损伤中的作用。方法 采用经神经生长因子(nerve growth factor, NGF)诱导分化后的PC12细胞模型，用随机数字表法将细胞分为对照(NC)组(正常培养)、脂肪乳空气对照(CA)组、脂肪乳低氧对照(CH)组、丙泊酚空气(PA)组、丙泊酚低氧(PH)组、3-AB(PARP-1抑制剂)组。采用乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)试剂盒检测上清液中LDH的水平；流式细胞技术检测细胞凋亡；RT-qPCR法检测多聚ADP核糖聚合酶1(poly ADP-ribose polymerase 1, PARP-1)、细胞凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor, AIF)蛋白的mRNA表达水平；Western blot检测PARP-1、多聚ADP核糖(polymerized ADP-ribose, PAR)及AIF蛋白表达水平；细胞免疫荧光技术检测AIF核质分布。结果 与NC、CA组比较，PA、PH组LDH水平及细胞凋亡增多(P<0.01),PARP-1和AIF的mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),胞质PAR聚合物形成增多(P<0.01),AIF核迁移显著增加(P<0.01);与CH、PA组比较，PH组LDH水平及细胞凋亡增多(P<0.01),PARP-1 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.01),胞质PAR聚合物形成增多(P<0.01),AIF核迁移增加(P<0.01);使用PARP-1抑制剂3-AB预处理可降低低氧复合丙泊酚引起的LDH水平及细胞凋亡增加(P<0.01),同时抑制PARP-1、AIF和PAR蛋白表达上调(P<0.01)。结论 低氧环境下丙泊酚可导致PC12细胞发生聚核糖性死亡，抑制聚核糖性死亡可缓解低氧复合丙泊酚对PC12细胞的损伤。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院