丁酸梭菌检测方法的建立

作者:刘秋晨; 吴怡琦; 翟宏旭; 陈玲; 刘恩; 施寿荣*; 刘艳*
来源:饲料研究, 2022, 45(23): 113-117.
DOI:10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.23.024

摘要

研究旨在建立丁酸梭菌的检测方法。试验将丁酸梭菌纯化菌粉稀释后涂布于改良FTG、FTG、TSC及TSN等4种不同培养基中,筛选适宜的培养基,并设置温度及pH值梯度筛选最适宜条件,再通过革兰氏染色镜检、生化鉴定、PCR及测序鉴定验证丁酸梭菌的检测方法。结果显示:通过观察形态及菌落计数筛选出一种成本低、专属性强、易于观察计数丁酸梭菌的改良FTG培养基;培养基pH值(7.0±0.2)、温度(37±1)℃为最适培养条件;所检测菌为革兰氏阳性,菌体为杆状或梭状,端生或次端生芽孢,对乳糖、水杨苷、木糖、淀粉、蜜二糖与棉籽糖呈阳性反应;样品及丁酸梭菌阳性对照均在548 bp处出现条带,序列同源性达96%以上,表明该检测结果的准确性较高。研究表明,试验筛选出一种专属性强、易于观察计数丁酸梭菌的改良FTG培养基,能够高效地检测丁酸梭菌含量。

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