利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析

作者：张伟涛; 程**; 周俊初

来源：生物技术通报, 2010, (11): 166-170+176.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.11.018

• 筛选
• 耐盐根瘤菌
• TAIL-PCR
• 耐盐基因 Screening Salt-tolerance rhizobium TAIL-PCR Salt-tolerance gene

通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15g/L NaCl,利用Tn5-sacB转座子对该菌株进行随机插入突变,从突变子中筛选获得30个共生缺陷型突变株。利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法克隆了突变株Tn5-sacB侧翼序列,通过BLAST发现有1个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白SilE有94%同源性,表明有关Na+离子的抗性基因可能与Ag+离子的抗性基因有某种关系。该基因在其它菌中也能抗其它金属离子(铜、锌、钴、铬)。

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 中南林业科技大学