摘要
以双孢菇为原料,通过硫酸铵盐溶、盐析、透析和反渗透方法提取双孢菇酪氨酸酶并进行纯化,探究其性质。结果表明,经丙酮沉淀和硫酸铵盐溶初步纯化的酪氨酸酶与粗酶相比较,酶活力(25 U/mL)提高5倍,比活力提高8.75倍;经60%饱和硫酸铵盐析、半透膜透析、反渗透进一步纯化后的酪氨酸酶与粗酶相比较,酶活力(25 U/mL)提高68.4倍,比活力提高501.2倍。通过测定双孢菇酪氨酸酶的性质发现,最适pH为6.5,最适反应温度为30℃,米氏常数为0.543 mmol/L,最大反应速度为41.5 U/min,反应速度与酶量、底物浓度的关系均符合酶促反应动力学。D-异抗坏血酸可有效抑制双孢菇酪氨酶的活性。
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单位郑州工程技术学院; 郑州轻工业学院