摘要

目的:建立枇杷清肺饮物质基准的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并建立同时测定其5种指标成分含量的定量分析方法,为该经典名方的质量控制及评价提供参考。方法:采用ACQUITY UPLC?CSHTMC18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0~7 min,5%~7%A;7~11 min,7%~8%A;11~22 min,8%~14%A;22~30 min,14%~15%A;30~35 min,15%~25%A;35~42 min,25%~40%A;42~45 min,40%~50%A;45~50 min,50%~60%A),流速0.35 mL·min-1,柱温25℃,检测波长278 nm和248 nm。建立15批枇杷清肺饮物质基准的UPLC指纹图谱,应用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件(2012版)进行相似度分析,并对共有峰进行归属。采用聚类分析(CA),主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱数据进行评价。利用UPLC指纹图谱方法测定5种成分的含量。结果:指纹图谱及含量测定方法的各项方法学验证均良好,15批枇杷清肺饮物质基准与对照指纹图谱的相似度均≥0.997,共标定了23个共有峰,指认出了11个色谱峰。CA,PCA及OPLS-DA可将15批物质基准分为两类。盐酸黄柏碱、绿原酸、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、甘草酸铵5种成分在一定质量浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(R2均>0.999),平均加样回收率96.47%~101.16%,在各物质基准中的质量分数范围分别为0.87~2.00,1.53~5.95,18.45~33.97,3.87~6.29,1.02~4.12 mg·g-1。结论:建立的枇杷清肺饮UPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法专属性强、分离度好、灵敏度高,除人参药味以外均有表征,可为该方剂复方制剂的质量控制与评价提供参考。

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