肝X受体负性调控枯否细胞中Toll样受体4通路减轻移植肝脏缺血再灌注损伤

作者：刘双权; 薛强; 成名翔; 夏丰; 龚建平; 涂兵

来源：中国新药与临床杂志, 2014, 33(06): 440-445.

• 肝X受体
• 枯否细胞
• 再灌注损伤
• Toll样受体4

目的探讨肝X受体(LXR)负性调控大鼠枯否细胞(KCs)中Toll样受体4(TLR4)通路对移植肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法密度梯度离心法分离培养SD大鼠肝脏KCs,将获得的细胞随机分为脂多糖(LPS)组、LPS+GW3965组、LPS+LXR拮抗剂组。动物实验选用雄性SD大鼠96只,随机分为GW3965预处理组(GW3965 0.3 mg·kg-1于手术前30 min经尾静脉注射处理供体)、生理盐水对照组(给予等体积生理盐水)。两组均采用改进的Kamada两袖套法进行肝移植。Western blot测定各组细胞、移植物中白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK-4)、干扰素调节因子-3(IRF3)蛋白表达,EMSA测定各组细胞NF-κB的相对活性,酶联免疫吸附法检测KCs培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素β(IFN-β),于移植肝脏再灌注后3、6、24 h测定血清丙氨酸转氨酶(ALT),光镜观察肝脏组织的形态学变化。结果 IRAK-4和IRF3蛋白表达、NF-κB相对活性、TNF-α和IFN-β水平在LPS+LXR拮抗剂组最高,而在LPS+GW3965组最低(均P<0.05)。GW3965预处理组各时间点组织的IRAK-4和IRF3蛋白表达量以及血清ALT活性明显低于对照组(P<0.05),GW3965预处理组各时间点肝组织的损伤均明显轻于对照组(P<0.05)。结论激活LXRs能负性调控KCs中TLR4信号通路的IRAK-4、IRF3的蛋白表达,抑制NF-κB的活化和炎症因子的释放,可减轻肝移植缺血再灌注损伤。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学附属第二医院