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摘要
本发明公开了一种能实现碱基精确点突变的pFC330-BEC质粒及其应用。所述pFC330-BEC质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示,其包含能够在黑曲霉中表达的rAPOBEC1-XTEN-nCas9-UGI融合基因片段、大肠杆菌抗性基因片段AmpR、pyrG筛选标记、丝状真菌自主复制序列AMA1、启动子Ptef以及质粒复制原点ori。所述质粒能够高效并且快速地将丝状真菌基因组上的任意位点的胞嘧啶突变成胸腺嘧啶,能够实现氨基酸的突变或基因的失活。所述质粒在丝状真菌的分子育种、生理特性、代谢产物、宿主改造、工业生产等方面具有广阔的应用前景,能为丝状真菌基因工程改造提供了新的技术平台。
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