特异性小干扰RNA下调中期因子基因表达对膀胱癌细胞化疗敏感性的影响

作者：范钰; 顾晓; 唐孝达

来源：中华泌尿外科杂志, 2010, 31(9): 604-607.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1000-6702.2010.09.010

• 膀胱肿瘤
• 中期因子
• 化疗敏感性

目的 观察中期因子(MK)基因小干扰RNA(siRNA)对膀胱癌细胞化疗药物敏感性的影响.方法 设计合成3个MK siRNA,转染人膀胱癌RT4细胞株,定量RT-PCR方法筛选下调MK mRNA效果最好的siRNA;以该siRNA转染RT4细胞后分组:空白对照组(Con-A)、空载对照组(Con-B)、错配对照组及MK siRNA 3.125、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00、200.00 nmol/L组,实时定量RT-PCR和蛋白质印迹方法检测各组细胞MK表达情况;噻唑盐法检测紫杉醇(PTX)对各组细胞生长的影响;通过检测caspase-3活性和TUNEL方法观察癌细胞凋亡情况.结果 3个siRNA均明显下调MK mRNA水平,以S3效果最好.PTX组、Con-A十PTX组、Con-B+PTX组、siRNA 12.50 nmol/L组、3.125 nmol/L+PTX组、siRNA 6.25 nmol/L+PTX组、siRNA 12.50nmol/L+PTX组肿瘤细胞抑制率分别为(18.21±0.36)%、(18.19±0.29)%、(17.89±0.33)%、(1.86±0.52)%、(32.56±0.53)%、(53.83±0.38)%、(78.95±0.55)%.TUNEL结果显示,ConA、Con-B、siRNA 3.125、6.25、12.50 nmol/L组凋亡指数分别为(1.81±0.36)%、(1.89±0.38)%、(5.56±0.58)%、(9.68±0.55)%和(15.25±0.56)%.结果 MK基因siRNA可增强膀胱癌细胞化疗敏感性,诱导凋亡是其重要机制之一.

• 单位
  扬州大学; 上海交通大学; 上海市第一人民医院; 江苏大学附属人民医院