58型人乳头瘤病毒L2蛋白的原核表达、纯化及单克隆抗体的制备

作者：林洁; 吕琦; 童亮; 刘芳; 马岚

来源：中国生物制品学杂志, 2011, (04): 398-403.

DOI：10.13200/j.cjb.2011.04.31.linj.004

• 58型人乳头瘤病毒
• L2蛋白
• 原核细胞
• 基因表达
• 蛋白质复性
• 抗体
• 单克隆 Human papillomavirus(HPV) 58
• L2 protein
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Protein renaturation
• Antibody
• monoclonal

目的原核表达并纯化我国高发的致宫颈癌58型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)次要衣壳蛋白L2,并制备其单克隆抗体。方法从含有HPV-58基因组的质粒pHPV58中扩增L2基因,插入改构的原核表达载体pGEX-KGV中,转化大肠杆菌BL21(DE3),乳糖诱导表达,透析复性并亲和层析纯化重组蛋白,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并对其进行鉴定。结果重组表达质粒pGEX-KGV-HPV58 L2经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量可占菌体总蛋白的15.5%;纯化的重组蛋白纯度可达95%;共获得10株抗HPV-58 L2的高效价单克隆抗体...

• 单位
  清华大学深圳研究生院; 云南大学