小鼠免疫细胞流式染色过程中细胞丢失量的影响因素

作者：郜珊珊; 伍俊; 周娟; 袁祖贻; 王丽君

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2019, 40(01): 134-137.

• 小鼠免疫细胞
• 多色流式标记
• 细胞丢失
• 缓冲液成分

目的观察和探讨小鼠免疫细胞多色流式染色过程中细胞丢失的影响因素。方法取C57BL/6J鼠制备脾细胞悬液,分别用不同种类、不同成分和不同pH值缓冲液洗涤和重悬细胞2次,并计数活细胞数量,观察对染色过程中的细胞丢失量有明显影响的因素。结果在小鼠免疫细胞的流式染色标记过程中,缓冲液种类对细胞丢失量有显著影响,含有钾离子的PBS缓冲液洗涤后会造成明显的细胞丢失;离心机转速过高或过低均会导致显著的细胞丢失;而缓冲液pH值的微量偏移和是否加入FBS/BSA对细胞的丢失影响不明显。结论小鼠免疫细胞的流式染色过程中使用含有钾离子的PBS缓冲液会造成明显的细胞丢失,应推荐使用不含钾离子的PBS缓冲液,同时保持离心转速适中。

• 单位
  西安高新医院; 神经内科; 西安交通大学第一附属医院