Notch1在对乙酰氨基酚诱导的肝损伤中的作用及机制

作者：邵宇云; 王涵; 王潇; 戴晶晶; 李军; 蒋龙凤^*

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2023, 43(10): 1350-1365.

• 对乙酰氨基酚
• 肝损伤
• 髓系特异性敲除
• Notch1
• TAK1
• 坏死性凋亡

目的：探讨Notch1信号通过转化生长因子β激活激酶1(transforming growth factor-β-activated kinase 1,TAK1)调控对乙酰氨基酚(acetyl-para-aminophenol,APAP)诱导的肝损伤(APAP induced liver injury,AILI)的作用机制。方法：髓系特异性Notch1敲除(Notch1M-KO)和对照floxed Notch1(Notch1FL/FL)小鼠通过腹腔注射APAP构建AILI模型。留取小鼠血清标本，用全自动生化分析仪及酶联免疫反应分析法检测肝功能和细胞因子。留取小鼠肝组织标本，HE染色观察肝组织病理损伤情况，使用Suzuki评分评估肝组织损伤程度，免疫印迹法检测TAK1、磷酸化TAK1(p-TAK1)、p65、磷酸化p65(p-p65)、Caspase-8(Casp-8)、受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1,RIPK1)、磷酸化混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,p-MLKL)的表达，免疫荧光染色观察CD11b、p-TAK1的表达及活性氧(reactive oxygen species ROS)水平。结果：小鼠腹腔注射APAP后，肝脏病理提示肝细胞体积增大，窦道淤血，出现广泛的坏死。与Notch1FL/FL对照组相比，Notch1M-KO小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)明显升高，血清炎性因子水平上升，HE染色显示肝细胞体积增大更明显，伴大面积坏死及炎性细胞浸润，DCF探针检测显示原代肝细胞内ROS增加。肝组织p-TAK1表达增加，Casp-8的表达减少，RIPK1、p-MLKL表达增加。结论：在AILI中，髓系特异性Notch1敲除可活化TAK1，降低Casp-8水平，激活RIPK1-MLKL坏死性凋亡通路，加重肝损伤的发生。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院