差速贴壁法体外培养人脐血内皮祖细胞的实验研究

作者：李建辉; 初少莉; 姬开达; 李华

来源：中华高血压杂志, 2008, (05): 450-454.

DOI：10.16439/j.cnki.1673-7245.2008.05.003

• 差速贴壁法
• 脐血
• 单个核细胞
• 内皮祖细胞 Differential attachment method
• Umbilical cord blood
• Mononuclear cells
• Endothelial progenitor cells

目的建立一种经济可靠、稳定、高纯度内皮祖细胞的培养方法。方法采用 Ficoll 密度梯度离心法从人脐血中分离单个核细胞,于包被人纤连蛋白的培养皿中贴壁培养,收集48 h后的悬浮细胞重新贴壁培养至第7天,利用免疫组化、免疫荧光及流式细胞术对培养的细胞进行鉴定。结果培养的细胞呈短梭形、多角型、胞体小;可见到大量典型的内皮祖细胞克隆;vWF 和 flk-1免疫组化细胞阳性率>95%,免疫荧光 Dil-ac-LDL 和 FITC-UEA-1双染阳性的细胞阳性率>98%,流式分析 CD_(133)~+细胞的百分率为(7.0±1.8)%。结论差速贴壁法是一种经济可靠、稳定、高纯度内皮祖细胞的培养方法。

• 单位
  上海市高血压研究所; 上海交通大学医学院附属瑞金医院