卷枝毛霉pyrG基因缺陷突变株的诱变筛选与鉴定

作者：张映曈; 陈海琴; 宋元达; 张灏; 陈永泉; 陈卫

来源：中国生物工程杂志, 2016, 36(03): 38-42.

DOI：10.13523/j.cb.20160306

• 卷枝毛霉
• 化学诱变
• 尿嘧啶缺陷型
• 电转化
• 番茄红素

为制备新的遗传筛选标记用于构建高产番茄红素的工程菌株,实验运用化学诱变的手段,以N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍为诱变剂,以番茄红素生产菌株卷枝毛霉MU616为出发菌株,诱变获得5株尿嘧啶缺陷型突变株,突变株在基本培养基中培养5天后仍不能生长。通过同源转化带有pyr G基因(编码乳清酸核苷-磷酸盐脱羧酶)的质粒p EPM1确定突变株Mt1、Mt4和Mt5为pyr G基因缺陷突变株。随之对pyr G突变株进行生长特性的研究和产番茄红素性能的检测,结果表明,其中突变株Mt4的生物量为(9.0±0.6)g/L,番茄红素产量在黑暗和光照条件下分别为(1 648±185)μg/g和(3 234±281)μg/g,均与出发菌株相似,适宜作为进行卷枝毛霉转化的带有遗传标记的受体菌。pyr G基因缺陷突变菌株的获得对构建高产番茄红素的卷枝毛霉工程菌具有重要的意义。

• 单位
  食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学