热休克蛋白70在缺糖损伤的HeLa细胞中对Bax和Bcl-2以及Bax构象改变的影响

作者：郝金玉; 杨玲; 刘晓宇; 刘雯; 左伋

来源：解剖学报, 2009, 40(03): 428-432.

• 缺糖
• 热休克蛋白70
• Bax
• Bcl-2
• 荧光免疫法

目的观察热休克蛋白70(Hsp70)对缺糖引起的HeLa细胞凋亡的影响,探讨其与凋亡相关的Bcl-2家族成员的相互作用关系。方法用人正义Hsp70重组质粒稳定转染HeLa细胞获得Hsp70过表达细胞。采用Hsp70过表达和正常HeLa细胞无糖培养建立两组细胞损伤模型,并均取3个平行样本。四甲基偶氮唑盐(MTT)法测细胞活率;Hoechst染色法和Giemsa染色法检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测Bax和Bcl-2的表达变化,并计算其灰度比值;细胞免疫化学和荧光免疫法检测Bax构象改变情况。结果缺糖48h内,Hsp70明显抑制了HeLa细胞凋亡并增强其活力,同时也抑制了凋亡细胞中Bax/Bcl-2的增高以及Bax的构象改变。结论缺糖诱导下,热休克蛋白70在HeLa细胞中能够通过与Bcl-2家族成员作用而抑制凋亡的发生。

• 单位
  复旦大学