摘要
目的:构建含有转铁蛋白受体(TFR)和血管内皮生长因子(VEGF)的双启动子慢病毒载体,体外转染中华小型猪骨髓间充质细胞并检测其表达。方法:PCR法分别扩增TFR和VEGF基因,分别克隆入pLenti-GFP-Neo慢病毒载体的CMV启动子和SV40启动子后,构建出双启动子调控的慢病毒表达载体pLenti-TG-VEGF。利用Lipofectin2000试剂将pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共转染293T细胞进行慢病毒包装,72 h后收集病毒上清,感染中华小型猪骨髓间充质细胞,并通过Western blot法检测TFR和VEGF的表达情况。结果:成功构建了含有TFR和VEGF...
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单位西京医院; 第四军医大学