大鼠ZnT1基因siRNA慢病毒载体构建及筛选

作者：房师强; 梅晰凡; 袁亚江; 郭占鹏; 郭跃; 曾锦浩; 王岩松; 尹海楠

来源：神经解剖学杂志, 2012, (06): 595-600.

• siRNA
• 慢病毒载体
• 锌离子转运体1
• GFP
• 大鼠 siRNA
• lentivirial vector
• ZnT1
• GFP
• rats

目的:构建并筛选针对SD大鼠锌离子转运体1(ZnT1)的siRNA慢病毒载体。并检测其在大鼠神经元中的作用。方法:设计并合成针对ZnT1基因的3条(A,B,C)siRNA序列与1条阴性对照序列,将以上序列退火与pFU-GW-iRNA质粒相连接,通过测序鉴定后,分别与慢病毒包装质粒共感染293T细胞,检测收获病毒滴度后感染体外培养的SD大鼠脑皮层神经细胞,设置感染复数(MOI)分别为1,3,6,8,于转染后72 h计算转染效率。在最佳MOI值下,设置未经病毒感染组(CON组)、阴性对照病毒感染组(NC组)和慢病毒阳性干扰组(ZnT1-siR-NA-A组,ZnT1-siRNA-B组,ZnT1-si...

• 单位
  辽宁医学院附属第一医院