H9亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：陆桂平; 曹军平; 王涛; 赵明军; 赵国; 刘秀梵

来源：畜牧与兽医, 2011, (07): 1-5.

• 禽流感病毒
• H9亚型
• 荧光定量RT-PCR avian influenza virus(AIV)
• H9 subtype
• Real-time RT-PCR

根据H9亚型禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计合成引物,以阳性H9亚型禽流感病毒HA基因重组质粒为标准品做标准曲线,建立了荧光定量逆转录聚合酶链反应检测方法。结果表明:本试验建立的标准曲线循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.997,灵敏度约为6拷贝/μL,对新城疫病毒和其他禽病病毒无交叉反应,特异性好,重复性佳,对193份临床泄殖腔棉拭样品的检测,其结果与经典病毒分离方法符合率大于90.0%。该方法为H9亚型禽流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速、较便宜、高通量、生物安全性好的定量检测手段,将在禽流感病毒临床样品快速筛检、流行病学监测等方面显示良好的应用前景。

• 单位
  扬州大学; 江苏农牧科技职业学院