摘要

研究铁皮石斛叶总黄酮(Total flavonoids of Dendrobium officinal leaf, TFDL)的D101型大孔吸附树脂纯化工艺及其抗氧化活性。以动态吸附率、解吸率和总黄酮含量为指标,对影响大孔吸附树脂纯化效果的因素进行分析,确定最优的吸附-解吸附工艺条件;以抗坏血酸(Vc)和乙二胺四乙酸(EDTA)为阳性对照,采用1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)法、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基(ABTS+)法和菲洛嗪(Ferrozine)法测定TFDL对DPPH和ABTS+的抗氧化活性以及对金属离子(Fe2+)的螯合能力。结果表明:总黄酮的最佳纯化工艺为上样液浓度2.2 mg/mL、上样液体积16倍床体积(Bed volume, BV)、上样液pH值2.4、洗脱液80%乙醇、洗脱体积3.25 BV(解吸率达到90.83%),室温,总黄酮含量可达到193.95 mg/g;在DPPH和ABTS+自由基清除以及Fe2+的螯合3种抗氧化体系中,TFDL抗氧化活性具有浓度依赖性,清除DPPH、ABTS+和Fe2+的半数抑制浓度(IC50)分别为0.1123、0.7845 mg/mL和0.6434 mg/mL,其中对DPPH的清除能力最强,即TFDL具有较强的提供氢原子的能力。D101大孔吸附树脂适用于对TFDL的分离纯化,铁皮石斛叶总黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性,有进一步开发的价值。