RNA干扰INHα基因对绵羊颗粒细胞周期及凋亡相关基因表达的影响

作者：李婷; 马爱团; 张英杰; 刘月琴; 段春辉

来源：畜牧兽医学报, 2017, 48(08): 1551-1556.

• INHα基因
• siRNA
• 绵羊
• 颗粒细胞

旨在研究RNA干扰INHα基因对绵羊颗粒细胞周期及凋亡相关基因表达的影响,明确抑制素对绵羊颗粒细胞的局部调节作用,为今后提高动物的繁殖力奠定基础。选用1.01.5岁的小尾寒羊,从卵泡(37mm)中分离培养颗粒细胞,将siINHα和siNC(阴性对照)转染颗粒细胞,以未转染的细胞为空白对照(Control),利用脂质体介导法进行转染,荧光定量RT-PCR检测INHα基因的沉默效率、细胞周期和凋亡相关基因的变化,流式细胞仪检测细胞周期的分布变化。结果表明,siRNA转染绵羊颗粒细胞48h后,INHα基因的沉默效率达85%以上。与阴性对照相比,细胞周期相关基因Cyclin D1和CyclinB1mRNA的表达水平分别降低了0.2倍和0.7倍(P<0.05),而p21的mRNA表达水平升高了0.9倍(P<0.05);细胞凋亡通路中的促凋亡因子Bax、p53和Caspase3的mRNA表达量分别升高了1.8倍、3.6倍和0.4倍(P<0.05),而抗凋亡因子Bcl-2mRNA表达量不受影响,阴性对照与空白对照差异不显著(P>0.05)。与阴性对照相比,细胞周期的分布显著改变,干扰组G1细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05),而阴性对照与空白对照间无显著差异(P>0.05)。综上表明,INHα作为绵羊颗粒细胞中关键的调控因子,通过调控绵羊颗粒细胞的生长和凋亡参与调控绵羊卵泡排卵的过程。

• 单位
  动物科技学院; 河北农业大学